小儿厌食症动物模型的客观标准研究

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小儿厌食症动物模型的客观标准研究

隆红艳　蒋雅萍

(南京市中医院,江苏　南京　210001)

　　摘　要:　目的　建立较稳定的、具有一定量化指标的小儿厌食症动物模型。方法　采用病因模拟法,给幼龄大鼠喂食特制饲料,建立厌食症动物模型,以摄食量、体重、Ghrelin水平变化及一般情况进行评价。结果　第7-28天,模型组大鼠平均摄食量、平均体重分别低于正常组30%以上、10%以上,Ghrelin(餐前)水平明显低于正常组。结论　病因模拟法制作小儿厌食症动物模型是可行的,Ghrelin水平检测可能成为评价该模型较客观的指标。

　　关　键　词:　厌食症;病因模拟;大鼠;动物模型　　中图分类号:　R28515;R72517　　文献标识码:A　　文章编号:100420668(2005)0220041202　　小儿厌食症是由于喂养不当、膳食结构不合理,致使小儿长期见食不贪、不欲进食,形体偏瘦而无其他临床表现的一种疾病。Ghrelin[3]是近年来发现的在胃内分泌、在餐前2小时分泌达高峰,从而刺激食欲增加的一种多肽激素,通过病因模拟法制作厌食症动物模型,以食欲、体重减退及影响食欲的Ghrelin水平变化为评价标准,更为准确、科学。现报道如下。1　材料与方法1.1　饲料配制[1]

随机分为对照组和模型组,每组12只,适应性喂养

2天后,对照组用常规饲料喂养,模型组用特制饲料喂养。所有动物均自由饮水,单笼饲养。1.3　观察及检测内容

观察动物外观、活动度、大便等一般情况,记录每日进食量及体重。于实验第27天禁食后采血,恢复进食一天,饱食后采血,测Ghrelin含量(试剂盒由北京康肽生物有限公司提供,美国Pheonix公司生产)。2　结果2.1　一般情况

实验过程中,对照组大鼠食量、体重逐天稳定上升,毛发光泽,表现活跃,模型组出现食量减少,体重增长缓慢,易激惹,大便干结,少数出现毛枯等脾虚运化失健、肝火偏旺症状。2.2　实验动物进食量的变化(下表1)

第14日21175±6126

14177±4148※※

特制饲料采用市售鱼松(三鸿牌)、奶粉(完达山

牌)、玉米粉、黄豆粉、白糖、鲜鸡蛋、肥猪肉七种食品按比例(1:1:1:2:1:1:8:2)混匀,捏成钱币大小饼,每块约20g,自然晾干,冷藏备用。1.2　动物和喂养

SD大鼠24只,日龄40～45天,体重(70±10)g,雌雄各半,由南京中医药大学实验动物中心供给。

组别对照组模型组

例数1010

第1日13126±211511140±2118

第7日

17179±3198

12116±3103※※※

表1　进食量变化

第21日

24176±5142

17147±4143※※

第27日

27110±5129

17123±3115※※※

　　　与对照组比,※P<0105,※※P<0101,※※※P<01001

2.3　实验动物体重的变化(表2)

表2　体重变化

组别

对照组模型组

例数1010

第1日91128±819991144±9149

第7日

137144±12179

第14日

184172±24179

第21日

216190±43164

178134±14111※

第27日

255100±60167

205194±12124※

117145±8175※※※155182±11136※※

　　　与对照组比,※P<0105,※※P<0101,※※※P<01001

　　表1、表2的结果显示,实验第1～6天,模型组

大鼠日平均进食量低于对照组30%左右,第7～28天模型组大鼠日平均进食量低于对照组40%～

50%,统计学处理有显著性差异;实验第1～7天模

型组大鼠平均体重低于对照组10%以内,与对照组无显著性差异;第7～28天,模型组大鼠平均体重低

基金项目:江苏省中医药管理局课题

作者简介:隆红艳,女,1971年6月生;硕士研究生,主治医师;研究方向:小儿脾胃系及肺系疾病的临床与科研。

・42・成都中医药大学学报　　　　　　　　　　　　　　　2005年第28卷

于对照组10%～15%,有显著性差异。说明造模成

功且稳定。2.4　实验动物Ghrelin水平的变化(表3)

组别例数对照组10模型组10

餐前Ghrelin水平

(pg/ml)

824188±503102▲△△△431167±224107△△△

机理研究中,近年来发现的Ghrelin[3]尤其应当重视。因为它是近年来科学家发现的一种在胃内分泌的生长激素促分泌素受体的内源性配体,它能增强食欲,调节能量平衡,其浓度增加可引起觅食行为。作为主要临床表现的食欲减退可以摄食量及体重变化来评估,但有时摄食量的变化是因为特制饲料乃高蛋白饲料,少量即可提供足够能量需求,不能直接反映食欲情况;本实验表明,模型组餐前Ghrelin水平明显低于对照组,与以上评价指标是一致的,故而认为Ghrelin水平变化可佐证食欲变化情况。

餐后Ghrelin水平

(pg/ml)113149±10715885132±35149

与对照组比,▲P<0105;餐前与餐后比,△△△P<01001

两组餐前Ghrelin水平明显高于餐后,进餐后Ghrelin水平明显降低;对照组餐前Ghrelin水平明显

高于模型组,餐后两组水平无明显差异,说明餐前Ghrelin水平可能是影响食欲的最主要因素。3　讨论

通过本实验表明,病因模拟法建立是小儿厌食症动物模型可行的,将摄食量、体重、Ghrelin水平综合评价,似更为全面、科学。

参考文献

1　陈小野1实用中医证侯动物模型学[M]1北京:北京医科

一般认为病因、症状和治疗反证是建立中医证候动物模型的三要素。小儿厌食症的主要病因是喂养不当,膳食结构不合理,造模因素容易被模拟;小儿厌食症的主要证候脾运失健证以长期食欲减退为临床表现,症状单纯,用进食粮、体重等指标即可评价;运脾复方治疗小儿厌食症已取得可靠疗效

[2]

大学、中国协和医科大学联合出版社,1993:47

2　汪受传,尤汝娣,郁晓维,等1运脾方药治疗小儿厌食症

,可

个临床与实验研究[J]1中西医结合杂志,1991,11(2):75

3　KojimaM,hosodaH,DateY,etal1ghrelinisagrowth-hor2mone-reasingacylatedpeptidefromstomach[M]1Nature,1999,402(6762):656-660

(收稿日期:2005202217)

以作为有效方药反证模型。本实验表明,用本法建立小儿厌食症动物模型在进食量、体重等指标是符合厌食症诊断标准的。同时,在探究厌食症的众多

　　(上接第35页)

示相反的作用,TSPG对提升WBC作用较弱(P>0105),PNS则抑制WBC的回升(P<0105)。实验动物的造血祖细胞培养结果显示,TSPG和PNS对外周血的影响与其对粒、红、巨核三系祖细胞增殖的促进作用有关,王亚平的研究证实这种促进主要是通过一些间接的方式,比如调控造血微环境中基质细胞分泌造血生长因子得以实现的[10]。

将TSPG直接加入造血祖细胞体外培养体系的结果显示,TSPG对三系造血祖细胞的集落形成有直接的刺激,这与前人报道TSPG有类造血生长因子或生长协同因子的报道相符;二者都显示对TSPG对CFU-GM作用稍弱;而西洋参茎叶皂甙对实验动物造血祖细胞生长促进主要表现在红系、巨核系造血,对巨核系造血可能既有直接作用又有间接作用,对粒系造血似无明显影响,高浓度的西洋参茎叶皂甙甚至对粒系造血产生抑制。另外,TSPG与PNS对造血影响的最适浓度也有差异。TSPG在25～100μg/mL范围内对三系祖细胞增殖都有促进作用,对

μ红系、巨核系最适刺激浓度是25g/mL,对粒系的最

μμ适刺激浓度是50g/mL。PNS在浓度为50～100g/

mL时对红系、巨核系有促进作用,其中巨核系作用

明显;25～50μg/mL时对粒系增殖没有明显影响,

100μg/mL时则表现抑制作用。

参考文献

1　王勇,祝彼得,王亚平1人参总皂苷体外刺激小鼠造血作

用机制研究[J]1中华血液血杂志,1995,12:648

2　方桂伦,高瑞兰1人参总皂甙对小鼠造血祖细胞的刺激

增殖作用[J],浙江医学,2000,7:26

3　高瑞兰,金锦梅,B.H.Chong1人参总皂甙对人血细胞生

成的研究[J]1浙江中医学院学报,1998,6:56

4　张均田1人参皂甙Rg1和Rb1药理作用的比较[J]1基础

医学与临床,2000,5:89

5　庄文选,孙莉华,蒋晓琴1人参与西洋参的临床应用比较

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9　牛泱平1人参二醇皂甙、三醇皂甙对人骨髓造血祖细胞

增殖作用的研究[J]1中国中西医结合杂志,2004,2:127

(收稿日期:2004211209)