・２８４・ 国际检验医学杂志２０１ｏ年３月第３ｌ卷第３期Ｉｎｔ Ｊ ＬａｂＭｅｄ，Ｍａｒｃｈ ２０１０，Ｖｏ１．３１，Ｎｏ．３ ・检验与临床・ ＵＦ一１０００ｉ尿沉渣分析仪细菌检测结果的临床应用价值 孙世忠，孙丽丽，刘丽文 （辽宁省人民医院检验科，辽宁沈阳１１００１６） 【摘要】 目的探讨ＵＦ—ｌＯＯ０ｉ尿沉渣分析仪（简称ＵＦ－１０００ｉ）细菌检测结果在尿路感染（Ｕｒｉｎａｒｙ ｔｒａｃｔ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，ＵＴＩ）的早 期诊断和早期治疗的临床应用价值。方法 用ＵＦ １０００ｉ对２００例疑似ＵＴＩ患者分别检测常规留尿标本（按检测尿常规要求留 取）和无菌留尿标本（按细菌培养要求留取）的细菌数量，并以细菌培养结果作为ＵＴＩ诊断的金标准，对两种方法留取的尿标本的 细菌检测结果分别做ＲＯＣ曲线。结果 ＵＦ－１０００ｉ对无菌留尿标本与常规留尿标本细菌定量的ＲＯＣ曲线的曲线下面积分别为 Ｏ．９７和０．８１，Ｐ＜０．０１。无菌留尿标本的细菌数以９２为阈值，敏感度为９５．１ ，特异度为９３．４ ，阳性似然比为１５．２，阴性似然 比为０．０４；常规留尿标本的细菌数以１３４为阈值，敏感度为７９．４ ，特异度为７６．８ ，阳性似然比为５．７，阴性似然比为０．１１。结 论ＵＦ－１０００ｉ无菌留尿标本的细菌定量结果可作为ｕＴＩ早期诊断与早期治疗的参考依据，也可对尿细菌培养起到筛选作用；用 ＵＦ－１０００ｉ分析尿液细菌最好用无菌留尿标本。 【关键词】泌尿道感染； 集落计数，微生物； 设备和供应 中图分类号：Ｒ４４６．１２；Ｒ６９１．３ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１６７３ ４１３０（２０１０）０３—０２８４—０２ ＵＦ－１０００ｉ使用流式细胞计数法，配置有专用的细菌分析 例。共分离出７５株菌，其中革兰阳性菌２２株，革兰阴性菌４７ 通道，比ＵＦ－１００等尿沉渣分析仪在细菌的检测方面有更高的 株，真菌６株。 准确性与特异性，但如何利用ＵＦ－１０００ｉ细菌检测结果来帮助 ２．描绘ＵＦ－１０００ｉ尿沉渣分析仪检测两种方法留取的尿液 临床对ＵＴＩ的诊断与治疗，国内外报道甚少。ｕＴＩ诊断的金 标本的细菌数的ＲＯＣ曲线，无菌留尿方法留取的尿标本细菌 标准是细菌培养与细菌计数口］，本组应用ＵＦ－１０００ｉ检测患者 检测值的ＲＯＣ曲线下面积为０．９７；常规方法留取的尿标本细 尿液细菌，通过与细菌培养结果比较来探讨其临床应用价值。 菌检测值的Ｒ０Ｃ曲线下面积为０．８１，Ｐ％０．０１。根据Ｙｏｕｄｅｎ 指数最佳反折点确定最大Ｙｏｕｄｅｎ指数，两种尿标本细菌检测 资料与方法 临界值评价见表１。 １．标本来源 ２００８年９～１１月收集本院疑似泌尿系统 表１最大Ｙｏｕｄｅｎ指数两种尿标本细菌检测临界值评价 感染就诊患者的尿液标本２００例，其中男患者８８例，女患者 １１２例，年龄８～８２岁。 ２．仪器与试剂 ＵＦ－１０００ｉ尿沉渣分析仪及相应的配套 试剂。 ３．细菌培养和菌种鉴定 严格按照中段尿采集指南进 行操作，用无菌容器收集患者清洁中段尿，立即送检，用定量接 种环取充分混匀的尿液１ Ｌ接种于血平板和麦康凯平板， 讨 论 ３７℃培养１８～２４ ｈ后进行菌落计数，以革兰阴性菌＞１Ｏ ＵＦ－１０００ｉ是ｕＦ系列的最新产品，它在细菌检测方面作 ｃＦｕ／ｍＬ或革兰阳性菌＞１０ ＣＦＵ／ｍＬ为培养阳性；当革兰阴 了很大改进，配置有专用的细菌分析通道，克服了ＵＦ－１００对 性菌为１Ｏ ＣＦｕ／ｍＬ时，再取一份标本做细菌培养，若两次结 细菌检测的诸多影响因素＿２］，提高了细菌检测的准确性与特异 果均为１０ ＣＦＵ／ｍＬ且为同一种菌时亦为培养阳性。若一份 性，但现在各大医院用作尿沉渣分析的尿标本并非无菌留尿， 标本含有两种或两种以上菌，则将菌落计数＞１０ ＣＦＵ／ｍＩ 的 在尿液留取的过程中容易受到杂菌的污染，产生假阳性结果。 细菌视为致病菌。尿细菌定量培养结果阳性时，对这些菌株作 本组以尿液细菌培养结果作为“金标准”，用ＵＦ－１０００ｉ检测两 进一步鉴定。 种方法留取的尿标本细菌数量，分别作ＲＯＣ曲线，无菌留尿曲 ４．真菌培养与鉴定 将尿液标本定量接种于科玛嘉念 线下面积为０．９７，说明诊断准确性较高；常规留尿曲线下面积 珠菌显色培养基，３５℃培养２４～４８ ｈ，观察菌落颜色与数量， 为０．８１，说明诊断准确性中等。两种方法留取的尿液标本细 真菌菌落数量＞１０。ＣＦＵ／ｍＬ者为培养阳性。 菌检测临界值等指标见表１，从表中可见其临界值远远小于 ５．ＵＦ－１０００ｉ检测尿液细菌 将接种培养基后的尿液充 ＵＦ一５０口 和ＵＦ－１００ 等尿沉渣分析仪，可能是ＵＦ １０００ｉ特异 分混匀，用ＵＦ－１０００ｉ进行尿沉渣分析，同时所有患者按一般常 性更高，从而降低了假阳性率。从本实验的Ｒ０Ｃ曲线及各种 规方法留取尿液标本，用ＵＦ－１０００ｉ进行尿沉渣分析，分别记录 数据可以看出用ＵＦ一１０００ｉ检测尿细菌数量，尿标本的留取方 细菌数。 法非常关键，检测尿常规留取的尿标本由于污染机会多，其临 ６．统计学方法 数据用ＳＰＳＳ１１．０统计软件进行处理 床应用价值远不如无菌留尿标本。 和分析，以尿液细菌培养结果作为金标准绘制ＲＯＣ曲线。 由于本研究真菌检测的阳性例数较少，因此，ＵＦ－１０００ｉ在 真菌检测方面的临床意义有待于进一步探讨。 结 果 总之，ＵＦ １０００ｉ的细菌检测结果临床诊断性较高，与细菌 １．尿细菌培养结果 ２００例尿标本细菌培养阳性７１ 培养比较，具有快速、便捷的优势，使泌尿系统感染患者早期诊 国际检验医学杂志２０１０年３月第３ｌ卷第３期Ｉｎｔ Ｊ Ｌａｂ Ｍｅｄ，Ｍａｒｃｈ ２０１０，Ｖｏ１．３１，Ｎｏ．３ ・ ２８５ ・ 断与治疗成为可能，同时对尿液细菌培养起筛选作用；在应用 ＵＦ一１０００ｉ作尿沉渣分析时，对疑似尿路感染的患者，最好采用 无菌留尿标本。 参考文献 ａｕｔｏｍａｔｅｄ ｕｒｉｎａｌｙｓｉｓ ｕｓｉｎｇ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ［Ｊ］．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｍｉ— ｃｒｏｂｉｏｌ，２０００，３８（８）：２８７０—２８７２． ｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｅｒ ［４］ Ｚａｍａｎ Ｚ．Ｕｎｓａｔｉｓｆａｃｔｏｒｖ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｏｆ ｆｌＵＦ－１００ ａｎｄ ｕｒｉｎｅ ｓｔｒｉｐｓ ｉｎ ｐｒｅｄｉｃｔｉｎｇ ｏｕｔｃｏｍｅ ｏｆ ｕｒｉｎｅ ｃｕｌｔｕｒｅｓ［Ｊ］．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２００２，４０（６）：２３１４—２３１５． ｄｓｏｎ ＭＭ，Ｓｉｍ Ｉ Ｒ，ｅｔ ａ１．Ｔｅｓｔｉｎｇ ｂｙ Ｓｙｓｍｅｘ ［５］ Ｅｖａｎｓ Ｒ，ＤａｖｉＵＦ１ ００ Ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｅｒ ａｎｄ ｗｉｔｈ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｃｕｌｔｕｒｅ ｉｎ ａ ｄｉ— ［１］Ｇｒａｈａｍ ＪＣ，Ｇａｌｌｏｗａｙ Ａ．Ｔｈｅ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ｕｒｉ一 ｎａｒｙ ｔｒａｃｔ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｐａｔｈｏｌ，２００１，５４（１２）：９１１— ９ｌ９． ａｎｏｎｓｔｉｃ：ａ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ［Ｊ］．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｐａｔｈｏｌ，２００６， ５９（６）：６６ｌ一６６２． ［２］秦桂娥，靳岩．ＵＦ－１００尿沉渣分析仪影响因素探讨［Ｊ］． 国际检验医学杂志，２００６，２７（１０）：９３５—９３７． ［３］Ｏｋａｄａ Ｈ，Ｓａｋａｉ Ｙ．Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｂａｃｔｅｒｉｕｒｉａ ｂｙ （本文编辑：杨庆华・收稿１５１期：２００９—０６—０１） 检验与临床・ ＳＤＳ—ＡＧＥ尿蛋白电泳对肾脏损伤部位的实验诊断分析 程中应 ，李培林 ，胡 芳 ，陈丽峰 ，刘 琴 ，汪宏良。 （１．湖北省黄石市中心医院检验科【摘要】 目的４３５０００；２．湖北省黄石理工学院医学院医学检验系４３５０００） 利用法国ＨＹＤＲＡＹＳ全自动电泳仪对非浓缩尿液中不同组分蛋白进行分离，区分尿蛋白类型，用于早期肾 应用十二烷基磺酸钠一琼脂糖凝胶（ＳＤＳ－ＡＧＥ）进行非浓缩尿蛋白电泳。对３Ｏ例原发性 损伤的诊断和评估肾脏损伤部位。方法肾病、１５例糖尿病。肾损伤、５例高血压。肾病患者和５例健康者（对照组）尿液样本进行分析。结果 ３Ｏ例原发性肾病患者尿蛋白 电泳样本中非选择性肾小球蛋白尿３例、选择性肾小球蛋白尿５例、肾小管性蛋白尿４例、混合性蛋白尿１８例。１５例糖尿病肾损 伤患者中非选择性肾小球蛋白尿２例、选择性。肾小球蛋白尿３例、肾小管性蛋白尿５例、混合性蛋白尿３例、生理性蛋白尿２例。 ５例高血压肾病患者中非选择性肾小球蛋白尿１例、选择性肾小球蛋白尿２例、’肾小管性蛋白尿１例、混合性蛋白尿１例。对照组 ５例均为生理性蛋白尿。结论于保存等优点。 【关键词】蛋白尿； 电泳，琼脂凝胶； 实验室技术和方法； 肾疾病 中图分类号：Ｒ４４６．１２２；Ｒ６９２ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１６７３—４１３０（２０１０）０３ ０２８５—０２ 本法具有检测敏感性高、方法简便、取材不需特殊要求，经扫描后可获取半定量结果，胶片存档易 蛋白尿是肾脏疾病及其他疾病并发肾损伤最常见的临床 表现之一，近年来对早期肾损伤的诊断和判断肾脏疾病的损伤 结 果 部位及病变程度已引起临床关注和重视，传统的肾活检方法不 但繁琐而且给患者带来创伤的痛苦，尿蛋白定性或定量有其局 限性。聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）技术鉴别蛋白尿的来源 要求预浓缩尿液，而且时间较长［ ，达不到当前临床需要。本 组应用十二烷基磺酸钠一琼脂糖凝胶电泳（ＳＤＳ－ＡＧＥ）技术获得 ５５例尿蛋白电泳结果，报道如下。 资料与方法 １．５５例ＳＤＳ－ＡＧＥ尿蛋白电泳结果，见表１。 表１ 各组病例ＳＤ ＡＧＥ尿蛋白电泳结果 １．标本来源 实验组５Ｏ例，为本院肾内科、内分泌科 和心血管内科住院患者。男３１例，女１９例。年龄１５～６３岁， 平均年龄４６岁。尿蛋白测定含量４Ｏ～１ １２０ ｍｇ／２４ ｈ。对照 组５例，为门诊健康体检者。尿蛋白定性为±～＋。 ２．仪器国进口。 ＨＹＤＲ ＡＳＹＳ全自动尿蛋白电泳仪（Ｓｅｂｉａ）法 １）Ｈｙｄｒａｇｅｌ Ｐｒｏｆｅｉｎｕｒｉｅ Ｋｉｔ（Ｓｅｂｉａ）进口原装。 １）样本收集及处理：取新鲜晨尿，收集尿蛋白 注：糖尿病肾损伤组有２例出现生理性蛋白尿，尿蛋白定量为４Ｏ ｍｇ／２４ ｈ、病程＜３年。 ３．试剂 ４．方法 讨 论 ２）试剂：生理盐水、０．１ 冰醋酸、１５ 甘油、０．２ 柠檬酸钠。 定性（５ 磺柳酸法）＋＋以上的尿液标本，电泳前用生理盐水 ＳＤＳ－ＡＧＥ电泳利用琼脂糖凝胶的成分选择性及多孔性结 合蛋白质相对分子量区分尿中不同蛋白组分，根据蛋白质相对 分子质量不同，以尿白蛋白中分子（约７０×１０。）为界限＿２］，将 尿蛋白分为小分子蛋白、比白蛋白分子量小的轻链二聚体（５０ ×１０。）、ａ 微球蛋白（３３×１０。）、游离轻链（２５×１０。）、视黄醇结 合蛋白（２１×１０。）、溶菌酶（１５×１０。）、Ｂ 微球蛋白（１２×１０。）。 比白蛋白分子量大的转铁蛋白（８０×１０。）、ＩｇＧ（１６Ｏ×１０。）、ＩｇＡ 稀释。２）操作：取一定量尿液或处理过的一定量尿液按电泳程 序完成后，取出胶片放人扫描仪扫描读取电泳结果报告。
