本法系依据在酸性溶液中考马斯亮蓝G250与蛋白质分子中的碱性氨基酸（精氨酸）和芳香族氨基酸结合形成蓝色复合物，在一定范围内其颜色深浅与蛋白质浓度呈正比，以蛋白质对照品溶液作标准曲线，采用比色法测定供试品中蛋 白质的含量。
本法灵敏度高，通常可测定1〜200μg的蛋白质量。本法主要的干扰物质有去污剂、TritonX-100、十二烷基硫酸钠（SDS)等，供试品缓冲液呈强碱性时也会影响显色。
试剂 酸性染色液取考马斯亮蓝G250 0.lg，加乙醇50ml溶解后，加磷酸100ml，加水稀释至1000ml，混匀。滤过，取滤液，即得。本试剂应置棕色瓶内，如有沉淀产生，使用前需经滤过。
对照品溶液的制备 除另有规定外，取血清白蛋白(牛）对照品或蛋白质含量测定国家标准品，加水溶解并制成每l ml中含l mg的溶液。
供试品溶液的制备 照各品种项下规定的方法制备(蛋白质浓度应与对照品溶液基本一致）。
测定法 精密量取对照品溶液0ml、0.01ml、0.02ml、0.04ml、0.06ml、0.08ml、0.1ml (对照品溶液取用量可在本法测定范围内进行适当调整），分别置具塞试管 中，各加水至0.1ml，再分别加人酸性染色液5.0ml，立即混匀，照紫外-可见分光光度法（通则0401) ，立即在595nm的波长处测定吸光度；同时以0号管作为空白。以对照品溶液浓度与其相对应的吸光度计算线性回归方程。另精密量取供试品溶液适量，同法测定，从线性回归方程计算供试品溶液中的蛋白质浓度，并乘以稀释倍数，即得。
【附注】本法测定时不可使用可与染色物结合的比色皿（如石英比色皿），建议使用玻璃比色皿或其他适宜材料的比色皿。
加入后5-20min线性关系最好，干扰物质少,K 、Na 、Mg2 离子、Tris缓冲液、糖和蔗糖、甘油、巯基乙醇、EDTA等均不干扰此测定法. 法的缺点是：（1）由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同,因此Bradford法用于不同蛋白质测定时有较大的偏差,在制作 标准曲线时通常选用 g—球蛋白为标准蛋白质,以减少这方面的偏差.（2）仍有一些物质干扰此法的测定,主要的干扰物质有：去污剂、 Triton X-100、十二烷基硫酸钠（SDS）和0.1N的NaOH.（如同0.1N的
酸干扰Lowary法一样）.
紫外-可见分光光度法
本法系依据蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸，其在280m波长处具最大吸光度，在一定范围内其吸光度大小与蛋白质浓度呈正比。本法操作简便快速，适用于纯化蛋白质的检测，一般供试品浓度为0.2〜2mg/ml。本法准确度较差，干扰物质多。测定法(2)适用于供试品溶液中存在核酸时的蛋白质测定。
对照品溶液与供试品溶液的制备 照各品种项下规定的方法制备。 测定法
（1 )取供试品溶液，照紫外-可见分光光度法（通则0401)，在280nm的波长处测定吸光度，以吸收系数法或对照品比较法计算供试品中蛋白质的含量。
( 2 )取供试品溶液，照紫外-可见分光光度法（通则0401)，在280 nm与260 nm的波长处测定吸光度，按下式计算供试品中蛋白质的含量。 蛋白质浓度（mg/ml) =1.45x A280一0.74 x A260
B C A法
本法系依据蛋白质分子在碱性溶液中将Cu2+还原为Cu+，2,2’-联喹啉-4,4'-二羧酸（BCA) 与Cu+结合形成紫色复合物，在一定范围内其颜色深浅与蛋白质浓度呈正比，以蛋白质对照品溶液作标准曲线，采用比色法测定供试品中蛋白质的含量。
本法灵敏度较高，测定范围可达80〜400μg。本法测定的供试品中不能有还原剂和铜螯合物，否则干扰测定。
试剂 铜-BCA试液取2,2’-联喹啉-4,4'-二羧酸钠lg，无水碳酸钠2g，酒石酸钠0.16g，氢氧化钠0.4g与碳酸氢钠0.95g，加水使溶解成100ml，调节pH值至11.25，作为甲液；另取4%硫酸铜溶液作为乙液。临用前取甲液100ml，加入乙液2ml，混匀，即得。
对照品溶液的制备除另有规定外，取血清白蛋白(牛)对照品或蛋白质含量测定国家标准品，加水溶解并制成每l ml中含0.8 mg的溶液。
供试品溶液的制备照各品种项下规定的方法制备(蛋白质浓度应与对照品溶液基本一致）。
测定法 精密量取对照品溶液0ml、0.lml、0.2ml、0.3ml、0.4ml、0.5ml (对照品溶液取用量可在本法测定范围内进行适当调整），分别置具塞试管中，各 加水至0.5ml，再分别加人铜-BCA试液10ml，立即混匀，置37°C水浴中保温3 0分钟，放冷，照紫外-可见分光光度法（通则0401)，立即在562mn的波长处测定吸光度；同时以0 号管作为空白。以对照品溶液浓度与其相对应的吸光度计算线性回归方程。另精密量取供试品溶液适量，同法测定。从线性回归方程计算供试品溶液中的蛋白质浓度，并乘以稀释倍数，即得。
不受去垢剂影响，受螯合剂和略高浓度还原剂的影响，与BSA法为最常用的蛋白含量测定方法
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