1l0 3讨论 内蒙古中医药 Rf值有影响,但对丹参的特征性斑点的清晰度和分离度没多大影 制剂中丹参的薄层鉴别方法原质量标准中以脂溶性成分丹参 响,此方案的可行性良好,表明此丹参鉴别方法可有效地控制复方 酮ⅡA作为丹参鉴别的指标成分,而复方万年青胶囊制法规定丹 万年青胶囊的质量。本试验方案是一套比较完整的考察薄层色谱 参为水煎煮入药,故以丹参酮ⅡA为指标鉴别丹参会致测定结果 鉴别的研究方案,该方案考察具体全面,可行性良好,所以可作为 不稳定。丹参中水溶性有效成分主要是酚酸类[31,故以酚酸类主要 中药薄层色谱鉴别的广泛应用方法。 成分丹酚酸B作为丹参鉴别的指标成分 ,与该制剂的制备工艺更 参考文献 吻合。 [1】国家药典委员会冲华人民共和国药典『s]冲国医药出版社,2010:70. 经系统的方法验证考察和耐用性试验考察,薄层板点分离良 [2]赵娜,郭治昕,赵雪,等.丹参的化学成分与药理作用【J].国外医 好,斑点特征清晰,阴性无干扰,表明此方法适用性强,同时验证3 药・植物药分册,2007,22(4):155—160. 批成品,结果均能检出相应色谱斑点,表明,此方法专属性和重现性 【3】杜冠华,张均田.丹参水溶性有效成分一丹酚酸研究进展IJI.基础 良好,可作为复方万年青胶囊制剂质量控制定性检测指标。 医学与临床,2000,20(5):10—14. 本试验建立系统鉴别丹参的薄层色谱法、方法学验证试验和 [4]柳丽,张洪泉.丹参活性成分的现代中药药理研究进展fJ1.中国野 耐用性试验,由丹参鉴别试验结果可以看出,薄层条件的改变会对 生植物资源,2003,22(6):1—4. 知柏地黄丸中盐酸小檗碱和丹皮酚的含量测定 毛爱丽 摘要:目的:提高知柏地黄丸的质量标准,建立同时测定盐酸小檗碱、丹皮酚含量的方法。方法:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂; 以磷酸盐缓冲液[0.05mol/L磷酸二氢钾溶液和0.05mol/L庚烷磺酸钠溶液(1:1),含0.2%三乙胺,并用磷酸调节_ ̄pH3.0]:乙腈(60:40)为 流动相,流速:1.000mL/min,检测波长:266nm,柱温:3O℃,进样量:lOIxL。结果:盐酸小檗碱、丹皮酚分别在0.9124~92.49761xg/mL(r= 1.000)和1.0424~104.24txg/mL(r=O.9999)的范围内呈良好的线性关系;平均回收率分别为99.8%(RSD=0.7%)和99.9%(RSD=1.1%)。结 论:本方法分离度好,快速,简便。可用于知柏地黄丸的质量控制。 关键词:高效液相色谱法;知柏地黄丸;盐酸小檗碱;丹皮酚 中图分类号:R927.2 文献标识码:A 文章编号:1006—0979(2015)02—0110—02 知柏地黄丸是由熟地黄、山茱萸、山药、牡丹皮、泽泻、茯苓、知 2.3专属性试验:按照“2.1”项下色谱条件,分别取对照品溶液、供试 母、黄柏8味药材组成,收载于《中国药典》,具有滋阴降火之效,临 床用于治疗阴虚火旺、潮热盗汗、口干咽痛、耳鸣遗精、小便短赤等 症状。因成分复杂质量较难控制,在质量标准项下只有马钱苷、丹 皮酚进行质量控制,而对君药黄柏中盐酸小檗碱没有控制。为保证 药品质量,本方法建立了高效液相法同时测定黄柏中盐酸小檗碱 和牡丹皮中的丹皮酚的方法。 1仪器与试药 品溶液、阴性对照溶液各lO ̄tL注入液相色谱仪,测定,供试品溶液 色谱中,在与盐酸小檗碱和丹皮酚对照品色谱保留时间相应处,均 出现相同的色谱峰。阴性对照溶液色谱中,在与盐酸小檗碱和丹皮 酚对照品色谱保留时间相应处,均未出现相同的色谱峰,表明测定 方法专属性好。盐酸小檗碱保留时间为10.86min,丹皮酚为 17.90min,两个峰之间的分离度大于3,理论塔板数均大于5000。色 谱图见图1。 岛津LC一2010C高效液相色谱仪;岛津uv一240型分光光度 计;PHS一3C型精密酸度计;METTLER AE 240电子分析天平;知柏 地黄丸3批(市售),用粉碎机粉碎处理。盐酸小檗碱对照品批号: 110713—200911,按c2f1H18CINO4计,含量为86.8%,使用前无需处理; 丹皮酚对照品批号:110708—200506,使用前无需处理,均购自中国 食品药品检定研究院。乙腈、甲醇、三乙胺均为色谱纯。其余试剂均 为分析纯。 2方法与结果 2.1色谱条件:色谱柱:DiamonsilM(钻石)TCl8(250mm ̄4.6mm,51xm), 流动相:以磷酸盐缓冲液[0.05mol/L磷酸二氢钾溶液和0.05mol/L 庚烷磺酸钠溶液(1:1),含0.2%三乙胺,并用磷酸调节至pH值 3.0]:乙腈(60:40),流速:1.OOmUmin,检测波长:266nm,柱温:30℃, 进样量:lOlL。 一 (a) (c) 2.2溶液的制备 2.2.1对照品贮备液溶液:精密称取对照品盐酸小檗碱26.28mg、丹 皮酚26.06mg,置同一50mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇 匀,作为贮备液。 2.2.2供试品溶液的制备:分别精密称取各个批号知柏地黄丸细粉 1.00g,精密加入甲醇50mL,精密称重,加热回流15rain,放至室温, 注:盐酸小檗碱(10.860min)、丹皮酚(17.889min) 图1混合对照品溶液(a)、供试品溶液(b)、阴性对照溶液(c)色谱图 4线性关系考察:精密量取上述对照品贮备液适量,稀释成含盐 补足减失的重量,摇匀,经微孑L滤膜过滤,取续滤液,即得知柏地黄 2.酸小檗碱0.9124、1.8249、4.5622、9.1244、13.68、18.25、27.37、36.50、 丸样品溶液。 25、92.50tzg/mI ,丹皮酚1.04、2.09、5.2、10.42、15.63、20.85、31.27、 2.2.3阴性对照溶液的制备:精密称取缺黄柏、牡丹皮的阴性样品 46.41.70、52.12、104.24txg/mL的系列混合对照品溶液。分别精密吸取 1.00g,按供试品溶液的制备方法制备,即得。 河南省鹤壁市食品药品检验所(458030) 2015年1月8日收稿 系列混合溶液各lOlL,按“2.1”项下色谱条件进行测定,以色谱峰 而积(A)对浓度(c)作线性回归,结果表明这两种成分峰而积与浓 2015年2月 111 度呈良好的线性关系。见表1。 方程,计算各成分的溶液浓度及含量,即得。结果见表2。 表1峰面积与浓度的线性关系 表2样品含量测定结果(mg/g n--4) 2.5精密度试验:精取同一浓度对照品溶液,连续进样6次,10 I/次, 在“2.1”项下色谱条件进样,测定峰面积,盐酸小檗碱、丹皮酚的 RSD分别为0.1%、0.1%。结果表明仪器精密度良好。 3讨论 2.6重复性试验:精密称取同一批供试品6份,按“2_2_2”项下供试品 3.1检测波长的确定:取盐酸小檗碱、丹皮酚对照品,分别用甲醇溶 溶液的制备方法制备,在上述色谱条件下进样,测定峰面积。RSD 解,在Uv一240分光光度计,200—400nm处扫描,两个成分的最佳检 分别为0.3%、0.2%,表明方法重复性较好。 测波长分别为:盐酸小檗碱266nm、丹皮酚275nm,因盐酸小檗碱为 2.7稳定性试验:取同一浓度对照品溶液,在室温避光密闭条件下, 新增检测成分,且受提取方法的,故选取盐酸小檗碱的最大吸 放置0、2、4、8、12、16、24h分别测定峰面积,盐酸小檗碱、丹皮酚的 收波长为测定波长。 峰面积RSD分别为0.5%、1.3%,结果表明在24h内具有良好的稳 3.2提取方法的确定:取样品分别用甲醇:水(1:1)、水、甲醇3种溶 定性。 剂,采用回流及超声两种方法,分别处理15min、30rain、lh,结果超声 2.8加样回收试验:精取已知盐酸小檗碱和丹皮酚含量的知柏地黄 处理不及回流效果好,前两种溶剂提取的样品溶液中盐酸小檗碱含 丸1.000g,共9份,分别精密加入对照品贮备液溶液2mL、3mL、5mL 量不及甲醇效果好。故采用甲醇提取,且基线平稳,更简便、易行。 各三份,照供试品溶液制备方法制备,测定含量,计算盐酸小檗碱 3.3丹皮酚在提取过程中,易随蒸汽挥发,故在回流过程中应注意 和丹皮酚加样回收率。盐酸小檗碱99.8%,RSD为0.8%(n=9),丹皮 密闭,以减少成分损失。 酚99.7%,RSD为1.1%(n=9)。 参考文献 2.9样品测定:按“2.1”项下色谱条件,对3批知柏地黄丸的供试品 …1国家药典委员会.中国药典(一部)【s].北京:中国医药科技出版 溶液进行分析,将盐酸小檗碱、丹皮酚的峰面积分别代人线性回归 社,2010. 关于冬虫夏草及其几种常见伪品的鉴别 戎海东 摘要:冬虫夏草是中药中比较常见的滋补类草药,含有粗蛋白、氨基酸、D一甘露醇等成分,具有较高的药用价值。现具体介绍冬虫夏 草的正品和几种常见伪品的鉴别,以避免混淆,危害健康。常见的伪品有伪虫草地蚕、分枝虫草、虫草、凉山虫草、伪虫草僵蚕、亚 香棒虫草、模型压制伪虫草等,本文从冬虫夏草的来源、形态、性状、颜色、显微、质地、气味等方面进行了阐述。 关键词:冬虫夏草;正品;伪品;鉴别 ‘ 中图分类号:R282.5 文献标识码:A 文章编号:1006—0979(2015)02—0111-02 冬虫夏草性温味甘,可滋肺补肾、益精气,用于治疗久咳虚喘、 对,以中部4对最明显。头部一般不甚明显,为红棕色或黄红色。尾 咯血、多汗、盗汗、阳痿遗精、腰膝酸痛,有较高的药用价值。现将正 如蚕尾,易折断,质脆,白色略发黄,断面略平坦。子座深棕色至棕 品冬虫夏草及其几种常见伪品的鉴别报道分析如下,以引起大家 褐色,圆柱形,细长,一般比虫体长,粗约3mm,长4~8cm,表面有细 的重视。 小纵向皱纹,顶部稍膨大。黄白色,折断面纤维状,质柔韧,味微苦, 1正品冬虫夏草【 -21 气微腥。以完整虫体丰满肥大,内白色,外色黄亮,子座短者为佳。 冬虫夏草为麦角菌科植物,寄生于鳞翅目蝙蝠蛾科昆虫蝙蝴 冬虫夏草虫体横切面:呈不规则形,其上着生长短不一的锐刺 蛾幼虫上的干虫体和燥子座的复合体。冬虫夏草主产于青海、西 毛和长绒毛,四周是虫体的躯壳,有的似分枝状,躯壳内为大量菌 藏、四川等省区,贵卅l、云南、甘肃等省亦生产,以四川嘉定府所产 丝,其问有裂隙。 , .’ 者最佳。 冬虫夏草子座横切面:子囊壳卵形呈椭圆形,周围由子囊壳组 本品由虫体及从虫头出的真菌子座相连而成,子座出自寄 成,下半部埋于凹陷的子座内。子囊壳内有多数线形子囊,每个子 主幼虫的头部,单生,细长如棒球棍状,长4~1lcm。上部为子座头部, 囊内又有2~8个线形的子囊孢子,期间有裂隙,充满菌丝 不 稍膨大,长1.5—4cm,呈圆柱形,褐色,密生多数子囊壳。子囊壳大部 育部分则完全见不到子囊壳。 分陷入子座中,先端突出于子座之外,长273~550wm,直径140~ 主要成分:冬虫夏草其成分主要包含粗蛋白25%一30%,氨基酸、 245 ̄m,呈卵形或椭圆形;每一子囊壳内有多数细长的子囊,每一子 脂肪、D一甘露醇(虫草酸)、虫草素(3、一脱氧腺苷)、麦角甾醇、虫草多 囊内都有2~8个有横隔的子囊孢子,大部分只有2个成活,呈线形。 糖、生物碱、尿嘧啶、腺嘌呤、腺嘌呤核苷等,尚含维生素B 磷、镁、 夏季,子囊孢子从子囊出后,产生芽管(或从分生孢子产 铁、钙、钛、钒等无机元素。虫草酸和虫草菌素是冬虫夏草的主要活性 生芽管)穿人寄主幼虫体内生长,染病幼虫钻入土中,冬季形成菌 物质。冬虫夏草性平味甘,主要功效为补肺益肾,止血化痰。 核,菌核破坏了幼虫的内部器官,且虫体的角皮仍完整无损。翌年 2伪品冬虫夏草鉴别 夏季,从幼虫尸体的前端生出子座。子座出土后,孢子未发散时挖 2.1分枝虫草:产自浙江,气清香、微腥、昧微苦。虫体似僵蚕而皱 取。晒至6 ̄7成干,除去似纤维状杂质及附着物,低温干燥或晒干。 缩,菌膜除去显黄褐色或黑褐色角皮,多染成黄绿色,子实体黑褐 冬虫夏草虫体形如蚕,粗约3-8mm,长3-5cm。外表深黄至黄 色,分枝1~3~5,由颈尖长出,子座柄细长,多弯曲,长3~5.5cm,直 棕色,环纹明显,粗糙,近头部环纹较细,共有20~30条环纹;全身 径1-2mm,稍扁,黑褐色,头部稍膨大或不膨大。表面有细小短绒状 有足8对,腹部有腹足5对,胸部有胸足3对,中部4对,近尾部1 突起,中心黄白色,断面外层黑色。 浙江省岱山县高亭镇中心卫生院(316200) 2.2伪品草地蚕:为唇形科植物地蚕及甘露子的块茎,呈长仿锥形 2015年1月16日收稿 或梭形,略弯曲,有3~15环节,长2 ̄5cm,粗3 10ram,上可见2个 (下转134页)