不同产地板蓝根中有机酸和腺苷类成分分析研究

）ＭｅｄｉｃａｌＨｅａｌｔｈｃａｒｅＡｐｐａｒａｔｕｓ２００８，１１１（５学术交流

不同产地板蓝根中有机酸和腺苷类成分分析研究马琳１程永红１李兰芳１孟祥超２

（１广州白云山和记黄埔中药有限公司，广东广州５１０５１５；２

广东岭南职业技术学院，广东，广州，５１０６６３）

【摘要】目的探索研究板蓝根药材质量控制标准。方法采用薄层色谱法对板蓝根中有机酸成分进行定性鉴别，用高效液相色谱法测定板蓝根腺苷类成分的含量。结果两种方法均操作简单，重复性好，准确可靠。结论可利用此方法控制板蓝根药材的质量。

【关键词】板蓝根；有机酸；腺苷中图分类号：Ｒ２８２．５

文献标识码：Ａ

文章编号：１００６－２６５３（２００８）０５－００４７－０２

ＳｔｕｄｉｅｓｏｎｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆｏｒｇａｎｉｃａｃｉｄｓａｎｄａｄｅｎｏｓｉｎｅｓｉｎｔｈｅＲａｄｉｘＩｓａｔｉｄｉｓｆｒｏｍｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｍｅｔｒｏｐｏｌｉｓＭａｌｉｎ１，ＣｈｅｎｇＹｏｎｇｈｏｎｇ１，ＬｉＬａｎｆａｎｇ１，ＭｅｎｇＸｉａｎｇｃｈａｏ２

（１．ＨｕｔｃｈｉｓｏｎＷｈａｍｐｏａＧｕａｎｇｚｈｏｕＢａｉｙｕｎｓｈａｎＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅＣｏｍｐａｎｙＬｉｍｉｔｅｄ，ＧｕａｎｇｄｏｎｇＧｕａｎｇｚｈｏｕ５１０５１５）

（２．ＧｕａｎｇｄｏｎｇＬｉｎｇｎａｎＰｏｌｙｔｅｃｈｎｉｃＣｏｌｌｅｇｅ，ＧｕａｎｇｄｏｎｇＧｕａｎｇｚｈｏｕ５１０６６３）

ＡｂｓｔｒａｃｔＯｂｊｅｃｔｓｔｕｄｙａｎｄｒｅｓｅａｒｃｈｏｎｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌｓｔａｎｄａｒｄａｂｏｕｔｔｈｅｍｅｄｉｃａｌｍａｔｅｒｉａｌｏｆＲａｄｉｘＩｓａｔｉｄｉｓ．ＭｅｔｈｏｄＴＬＣｗａｓｕｓｅｄｔｏｉｄｅｎｔｉｆｙｏｒｇａｎｉｃａｃｉｄｓｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅｌｙａｎｄＨＰＬＣｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆａｄｅｎｏｓｉｎｅｓｉｎｔｈｅＲａｄｉｘＩｓａｔｉｄｉｓ．Ｒｅｓｕｌｔｔｗｏｍｅｔｈｏｄｓｗｅｒｅｏｐｅｒａｔｅｄｓｉｍｐｌｙ，ｇｏｏｄｒｅｐｅａｔａｂｉｌｉｔｙ，ａｃｃｕｒａｔｅａｎｄｒｅｌｉａｂｌｅ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎｔｈｅｍｅｔｈｏｄｓｃｏｕｌｄｂｅｕｓｅｄｔｏｃｏｎｔｒｏｌｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｏｆｍｅｄｉｃａｌｍａｔｅｒｉａｌｏｆｔｈｅＲａｄｉｘＩｓａｔｉｄｉｓ．

ＫｅｙｗｏｒｄｓｒａｄｉｘＩｓａｔｉｄｉｓ；ｏｒｇａｎｉｃａｃｉｄ；ａｄｅｎｏｓｉｎｅ

板蓝根为十字花科植物菘蓝（ＩｓａｔｉｓｉｎｄｉｇｏｔｉｃａＦｏｒｔ）

的干

２方法与结果

２．１层析条件展开系统：氯仿－正丁醇－甲酸（６：３：

）；点样量：５μ１Ｌ；显色剂：０．５％溴甲酚绿乙醇溶液，喷雾后置于薄层加热器上加热至斑点清晰（约２５分钟，在蓝色的背景上显黄色斑点），层析图谱见图１。

燥根，始载于《神农本草经》。有清热解毒、凉血利咽之功效，临床上广泛用于抗病毒、抗菌、并有抗肿瘤、增强机体免疫力的功能、抗内毒素作用［１－４］。其中的腺苷成分的含量与其抗病毒作用成正比，而且从板蓝根中分离出９种有机酸成分，具有很强的抗内毒素作用［５－７］。２００５版中国药典一部中，板蓝根药材的的鉴别项为荧光和氨基酸的定性鉴别，专属性不够强；浸出物的测定也不能有针对性地区别和保证药材的质量。鉴于此，我们对其中的有机酸和腺苷成分进行了分析方法的研究，为板蓝根药材质量控制提供了实验依据。

图１不同产地板蓝根药材有机酸ＴＬＣ图

１仪器、试剂和试药

Ａｇｉｌｅｎｔ１１００系列高效液相色谱仪，Ａｇｉｌｅｎｔ自动进样器，ＡｇｉｌｅｎｔＤＡＤ检测器，甲醇（色谱醇，德国Ｍｅｒｃｋ公司），乙腈

（色谱醇，美国Ｔｅｄｉａ公司），乐百氏纯净水；层析缸（２２×），电热鼓风干燥箱，薄层层析硅胶（青岛海洋化工有１２ｃｍ

限公司），羧甲基纤维素钠（上海化学试剂厂），均为分析纯；板蓝根对照药材，对照品腺苷（批号０７９７９８０３），由中国药品生物制品检定所提供。

第一作者简介：马琳（１９７８—），女，大学本科，助理工程师，从事中药材和中成药

质量标准研究。

２．２对照药材的制备取药材粉末１０ｇ置于１００ｍＬ锥形

瓶中，加入２５ｍＬ氯仿，用ＩＭＨＣＬ调节ｐＨ至３，用超声提取１５分钟，过滤，滤液浓缩至干，用１ｍＬ甲醇溶解，备用。

）２．３样品液的制备方法同对照药材图谱中的样品（产地顺序从左至右依次为：河南，东北，河北，安徽（临泉），山东，浙江，安徽（邓庙），对照药材，江苏，安徽（阜南）。

２．４色谱条件色谱柱ＷａｔｅｒｓＯＤＳＣ１８（４．６ｘ２５０ｍｍ，

）；流动相：甲醇—乙腈—水（２：５：９３）；流速：５μｍ

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学术交流

表１板蓝根药材中腺苷的测定结果（ｎ＝６）

２００８年第５期（总第１１１期）

）ＭｅｄｉｃａｌＨｅａｌｔｈｃａｒｅＡｐｐａｒａｔｕｓ２００８，１１１（５Ａ

表２不同产地板蓝根药材中腺苷的含量

Ｂ

图２腺苷对照品（Ａ）和板蓝根（Ｂ）ＨＰＬＣ图

１．０ｍＬ／ｍｉｎ；检测波长：２６０ｎｍ；进样量：１０μＬ。

２．５对照品液的制备精密称取腺苷１０ｍｇ，置５０ｍｌ量瓶

中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取２ｍＬ，置１０ｍＬ量瓶中，加甲醇稀释至刻度。

ＩＭＨＣＬ的量进行考察，制备各种供试品溶液，经筛选，得出

本实验方法为最佳前处理方法。

２．６供试品溶液的制备精密称定本品粉末１．０ｇ，置试管

中，加水２０ｍＬ，精密称量，超声提取３０分钟，精密称重，以水补足损失的重量，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

３．２ＴＬＣ层析比较了多种不同展开系统，最后采用氯仿－

正丁醇－甲酸系统，并以６：３：１为最佳比例。

３．３腺苷测定方法的研究中，分别采用了不同流动相，通过试验确定以甲醇－乙腈－水（２：５：９３）分离效果较好。

３．４以此条件进行板蓝根质量控制，不同产地药材有机

酸图谱对比清晰，由斑点清晰程度与大小深浅可看出，安徽产地的有机酸种类较多，斑点面积较大，颜色较深。

２．７线性范围的考察精密量取腺苷对照品液（０．１９９８ｍｇ／

）分别进样２．５、５、１０、１５、２０、２５μＬ，按上述色谱条件ｍＬ

测定其峰面积。以腺苷进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，计算得回归方程为Ｙ＝１６５３．７Ｘ＋２１．７０５，ｒ＝

３．５以此条件进行板蓝根质量控制，不同产地腺苷含量

也有较大差距，能够明显鉴别出板蓝根药材的优劣，以安徽产地的腺苷含量较高，提供了一种更精确控制和评价板蓝根药材质量的标准。

０．９９９８。结果表明腺苷在０．４９９５￣４．９９５０ｍｇ内与峰面积值呈良

好线性关系。

２．８精密度试验取腺苷对照品溶液１０μＬ，重复进样６

次，测定腺苷峰面积值，ＲＳＤ＝０．９２％。

参考文献

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中国科学技术出版社，１９９２：３５７．

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）：２９７．１９９５，２６（５

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［８］方淑贤，刘云海，谢委．板蓝根有机酸等中药成分抗内毒素研究现状［Ｊ］．中国药房，２００３，１４（１１）：６９１－６９３．!

２．９稳定性试验取供试品溶液分别于０、２、４、６、８ｈ

进样１０μＬ，测得样品中腺苷含量的峰面积值ＲＳＤ＝０．９０％，结果表明供试品液在６ｈ内稳定。

２．１０重现性试验取同一样品６份，按上述方法制备供

试品溶液，测定其中腺苷峰面积，其ＲＳＤ＝１．９８％（ｎ＝６）。

２．１１回收率试验精密称定已测定腺苷含量为０．１４８８ｍｇ／ｇ的样品１．０ｇ，精密加入腺苷对照品０．１４６８ｇ；按上述制备供

试品溶液的方法操作，本方法回收率在９５．６％～１０１．５之间％，

ＲＳＤ＝２．１％。

２．１２样品含量测定取６批样品按照制备方法制备样品

溶液，腺苷含量测定方法测定样品中的腺苷的含量，结果见表１，色谱图见图２。

３讨论

３．１在有机酸薄层色谱方法的探索中，对提取溶剂和提

取方法进行了对比分析，同时对超声提取，加热回流及加入

责任编辑仇洁ｙｌｂｊ００３＠１２６．ｃｏｍ

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