2010/11/24
根据跑胶结果初步认定：1，2，4，5为Pmd18Tvecter 认定8#可能是连接上的
认定3，6，7，9，12，13，16，17，19是同一样大的 认定10 14 15 18是大小一样的 认为11孔pmd18Tvector是自连的
注：14，15是同一管菌中提出来的，14是直接提的，15是用14的废液提的 选1作对照， 3，6，8，10，13，16，19用xba1做酶切
结果预期：为一个2490左右的片段，一个1068左右的片段37℃
Xba1 BsaA Buffer m 2466Nagb-T H2o
1μl 1ul 1μl 5μl 2ul
最后一个孔是pet22b对照
所以只有一个有可能就是第六个孔对应的13032-nagB-pet22b 14# 拿来做hind 111酶切
结果预期：切下来一个762bp的片段和一个5482bp左右的片段 酶切体系37℃
HindⅢ Buffer M Atcc13032nagB-pet22b H2o
1μl. 1μl. 5μl. 3ul.
1，5孔为大小一样的质粒 2，4孔为大小一样的质粒 3，6孔为大小一样的质粒
选1 2 3 做xho1和Nco1双酶切 37℃ 预期一个一千多的片段一个5000多的片段
Xho1 Nco1 Buffer h An-pet15b H2o 1μl 1ul 1μl 5μl 2ul
酶切验证图
20101125酶切验证 2466nagb-t3# 2466nagb-t6# 2466nagb-t8# 2466nagb-t10# 2466nagb-t13# 2466nagb-t15# 2466nagb-t18# an表皮葡萄球菌-pet15b3# an表皮葡萄球菌-pet15b6# an表皮葡萄球菌-pet15b7# 13032nagb-pet22b14# 13032nagb-pet22b18#
经上图我们认为2466nagb-t10# 是正确的 其余的构建都不正确
因篇幅问题不能全部显示，请点此查看更多更全内容